產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
新型轉(zhuǎn)染試劑是一種多用途的轉(zhuǎn)染試劑,適用于將核酸(DNA、RNA)轉(zhuǎn)入真核細(xì)胞,可在各種貼壁和懸浮細(xì)胞系中提供轉(zhuǎn)染,并在保證轉(zhuǎn)染效率的同時(shí)具備較低的細(xì)胞毒性,增加細(xì)胞的存活率。新型轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染時(shí),血清的存在不影響轉(zhuǎn)染效率,且轉(zhuǎn)染后無(wú)需更換培養(yǎng)基。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 細(xì)胞毒性低(細(xì)胞存活率高達(dá)90%);
2. 轉(zhuǎn)染效率高;
3 .適用范圍廣:貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞(哺乳動(dòng)物細(xì)胞系)的轉(zhuǎn)染;
4. 適用于高通量應(yīng)用的可靠性能。
使用方法:
轉(zhuǎn)染前一天,在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中重新接種細(xì)胞,使其在轉(zhuǎn)染DNA時(shí)具有70-90%的匯合度,對(duì)于siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞應(yīng)該具有30-50%的匯合度。
根據(jù)表格優(yōu)化DNA(siRNA)優(yōu)化更高的轉(zhuǎn)染效率:轉(zhuǎn)染試劑變化范圍為2-5倍
|
100mm |
60mm |
35mm |
6孔 |
12孔 |
24孔 |
48孔 |
96孔 |
每孔表面積 |
60cm2 |
20cm2 |
10cm2 |
10cm2 |
4cm2 |
2cm2 |
0.8cm2 |
0.3cm2 |
添加的培養(yǎng)基體積 |
10ml |
5ml |
2ml |
2ml |
1ml |
500μl |
200μl |
100μl |
稀釋培養(yǎng)基體積 |
1ml |
500μl |
200μl |
200μl |
100μl |
50μl |
20μl |
10μl |
用于DNA轉(zhuǎn)染試劑 |
20μl |
10μl |
4μl |
4μl |
2μl |
1μl |
0.4μl |
0.2μl |
DNA |
10μg |
5μg |
2μg |
2μg |
1μg |
0.5μg |
0.2μg |
0.1μg |
用于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑 |
10μl |
5μl |
2μl |
2μl |
1μl |
0.5μl |
0.2μl |
0.1μl |
siRNA |
200pmol |
100pmol |
40pmol |
40pmol |
20pmol |
10pmol |
4pmol |
2pmol |
2.在Opti-MEM減血清培養(yǎng)基中稀釋YosiTrans Y-20,不添加血清。在室溫下靜置5分鐘。
3.將稀釋的DNA或siRNA與稀釋的YosiTrans Y-20混合。輕輕混合并在室溫下孵育20分鐘。
4.將上述復(fù)合物加入到含有細(xì)胞和培養(yǎng)基的每個(gè)孔中。通過(guò)來(lái)回?fù)u動(dòng)平板輕輕混合。
5.將細(xì)胞放入37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-72小時(shí),直到準(zhǔn)備好進(jìn)行測(cè)定。轉(zhuǎn)染后4-6小時(shí)可更換培養(yǎng)基。
注意事項(xiàng):
免責(zé)聲明: 本公司將不為任何不正常使用此產(chǎn)品時(shí)所發(fā)生的意外負(fù)責(zé)。
儲(chǔ)存條件:冰袋運(yùn)輸。在0-8°C避光保存2年。