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胰酶

貨號:R21-332A
規(guī)格:100ml
價格/元:160
  • 詢價

產(chǎn)品介紹:

組織細胞的體外培養(yǎng)和原代細胞培養(yǎng)中的組織細胞分散(將組織塊制備成單個細胞懸液)以及傳代細胞培養(yǎng)中,貼壁生長細胞的消化分散均要使用組織細胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶,EDTA等,其功能主要是使細胞間的蛋白質(zhì)(如細胞外基質(zhì))水解,使組織或貼壁細胞分散成單個細胞,制成細胞懸液用于進一步的實驗。

 

別名 胰酶 胰蛋白酶
英文名稱 Trypsin-EDTA solution,0.25% (without phenol red)
CAS 9002-07-7
分子式 C6H15O12P3
分子量 24000
儲存條件 -20℃
外觀(性狀) 紅色或類紅色
單位 100ml/瓶 20瓶/箱

保存:-20℃保存,有效期12個月。

本品含 0.25%胰酶和 0.02%EDTA(0.53mM),含酚紅,溶于無鈣鎂平衡鹽溶液中,經(jīng)過濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細胞和組織的消化。
特點:
本產(chǎn)品具有方便快速、穩(wěn)定安全、性價比高,不影響細胞狀態(tài)等特點。

高濃度的胰蛋白酶濃度孵育細胞或過長的時間周期,會損傷細胞膜并導(dǎo)致細胞死亡。原代細胞特別敏感。如果不確定使用的胰蛋白酶的濃度,使用低濃度稀釋(1:10或1:5)。

消化濃度和時間取決于細胞類型、種群。
僅用于科研研究使用,不允許人或動物臨床醫(yī)療等應(yīng)用。

使用方法:

以下操作以貼壁細胞的消化為例:

1) 吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。

2) 加入少量胰蛋白酶消化液,蓋過細胞即可,室溫放置1-2分鐘。不同的細胞消化時間有所不同,對于貼壁牢固的細胞可適當(dāng)延長消化時間。

3) 顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用*吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除消化液。加入含血清的細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。

4) 如果發(fā)現(xiàn)消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。

5) 如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。

備注:本品用于組織的消化時,不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

注意事項:

1.本品長期保存需放-20℃凍存,在使用前提前取出放4℃冰箱解凍,長時間靜置可能會造成顏色以及成分不均勻,請在使用前搖勻.

2 .由于每種組織或細胞性質(zhì)不同,應(yīng)依據(jù)具體情況,確定**消化時間;消化細胞時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁和生長狀況;

2.本產(chǎn)品不含抑菌劑,在使用過程中要特別注意無菌操作,避免消化液被污染;

3.解凍后液體不宜4℃長期保存,盡量避免反復(fù)凍融,小量使用時建議分裝密封凍存,分裝過程請注意無菌操作;

4. 為了您的安全和健康,請在注意操作安全,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


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