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BCA蛋白定量試劑盒

貨號(hào):R50-635A
規(guī)格:500次
價(jià)格/元:680
  • 詢價(jià)

產(chǎn)品說明:

對(duì)于微量或少量的血液樣品,可以在一步中不進(jìn)行離心棄上清的操作,直接在第二步中加入10倍血液體積的紅細(xì)胞裂解液,并在冰上裂解4-5分鐘。對(duì)于鼠的血液,裂解4-5分鐘已經(jīng)足夠,對(duì)于人的外周血,宜延長(zhǎng)裂解時(shí)間至10分鐘,但通常不宜超過15分鐘,并且裂解過程中宜適當(dāng)偶爾搖動(dòng)以促進(jìn)紅細(xì)胞裂解。后續(xù)步驟相同。蛋白質(zhì)定量是蛋白質(zhì)研究的基礎(chǔ)工作之一。BCA(bicinchoninic acid)是理想的蛋白質(zhì)定量方法;是當(dāng)前比Lowry 法更優(yōu)越的專用于檢測(cè)總蛋白質(zhì)含量的產(chǎn)品。該方法以快速靈敏、穩(wěn)定可靠,對(duì)不同種類蛋白質(zhì)檢測(cè)的變異系數(shù)非常小而倍受專業(yè)人士的青睞。BCA 法測(cè)定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。在組織細(xì)胞裂解實(shí)驗(yàn)中,常用濃度的去垢劑SDS,Triton X-100,Tween不影響檢測(cè)結(jié)果,但受螯合劑(EDTA,EGTA)、還原劑(DTT,巰基乙醇)和脂類的影響。實(shí)驗(yàn)中,若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高,可試用Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒。
該產(chǎn)品不受此影響,因此與之配合使用,可免除您實(shí)驗(yàn)中的許多煩惱。該試劑盒在31.25--2000ug/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。

使用說明:
配制工作液: 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品數(shù)量,按 50 體積 BCA 試劑 A 加 1 體積 BCA 試劑 B(50:1)配
制適量 BCA 工作液,充分混勻。
2、稀釋標(biāo)準(zhǔn)品:將標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)存液稀釋至 31.25~2000ug/ml,推薦使用去離子水或 0.9% NaCl。
管號(hào) 稀釋液體積 標(biāo)準(zhǔn)品體積 終濃度
A 360ul 240ul(5mg/ml) 2000ug/ml
B 300ul 300ul(從 A 管取) 1000ug/ml
C 300ul 300ul(從 B 管取) 500ug/ml
D 300ul 300ul(從 C 管取) 250ug/ml
E 300ul 300ul(從 D 管取) 125ug/ml
F 300ul 300ul(從 E 管取) 62.5ug/ml
G 300ul 300ul(從 F 管取) 31.25ug/ml
H 300ul 0ul                         0ug/ml(空白)
3、 將 25ul 的標(biāo)準(zhǔn)品和合適濃度范圍的樣本(比如 5ul 樣品+20ul 稀釋液)分別添加于 96 孔板的微孔中。
4、 各孔加入 200ul BCA 工作液,充分混勻。
5、 蓋上 96 孔板蓋,37℃孵育 30 分鐘(如果濃度較低,可適當(dāng)提高孵育溫度或延長(zhǎng)孵育時(shí)間) 。
6、 冷卻到室溫,用酶標(biāo)儀測(cè)定 A562,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出蛋白濃度。

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