標(biāo)簽抗體由兩部分組成：蛋白標(biāo)簽和目的蛋白。蛋白標(biāo)簽是利用DNA體外重組技術(shù)，與目的蛋白一起融合表達(dá)的一種多肽或蛋白。這些標(biāo)簽通常是一段特定的氨基酸序列，它們對(duì)目的蛋白的功能影響極小，但能夠賦予融合蛋白一些新的特性，如易于純化、檢測(cè)和示蹤等。標(biāo)簽抗體的合成正是基于抗原-抗體反應(yīng)原理，這些抗體能夠高度特異地結(jié)合對(duì)應(yīng)的標(biāo)簽融合蛋白。

常見蛋白標(biāo)簽及其應(yīng)用

His標(biāo)簽：由六個(gè)組氨酸殘基（HHHHHH）組成的短肽，被認(rèn)為是蛋白純化的優(yōu)先標(biāo)簽。His標(biāo)簽分子量極?。s0.84KD），可插入在目的蛋白的C末端或N末端。其側(cè)鏈與固態(tài)的鎳有強(qiáng)烈的吸引力，可用于固定化金屬螯合層析（IMAC），實(shí)現(xiàn)重組蛋白的分離純化。His標(biāo)簽具有操作簡(jiǎn)便、對(duì)目的蛋白特性影響小、免疫原性低等優(yōu)點(diǎn)。

Flag標(biāo)簽：由八個(gè)氨基酸（DYKDDDDK）組成的短肽，專門設(shè)計(jì)用于重組蛋白質(zhì)的免疫吸附純化。Flag標(biāo)簽結(jié)構(gòu)短小，且與融合蛋白質(zhì)之間含有一個(gè)腸激酶切割位點(diǎn)，可以通過腸激酶切割被除去。Flag標(biāo)簽具有抗原肽編碼簡(jiǎn)單、純化效率高、不影響融合蛋白活性等優(yōu)點(diǎn)。

GST標(biāo)簽：GST標(biāo)簽蛋白本身是一個(gè)在調(diào)解過程中起到重要作用的轉(zhuǎn)移酶，天然大小為26KD。GST融合表達(dá)系統(tǒng)廣闊應(yīng)用于各種融合蛋白的表達(dá)，可在大腸桿菌和酵母菌等宿主細(xì)胞中表達(dá)。GST標(biāo)簽有助于保護(hù)重組蛋白免受胞外蛋白酶的降解并提高其穩(wěn)定性，同時(shí)便于使用酶學(xué)分析或免疫分析進(jìn)行檢測(cè)。

Avi-Tag：一個(gè)15個(gè)氨基酸的短肽，具有一個(gè)單生物素化賴氨酸位點(diǎn)，可用于蛋白質(zhì)分離純化和蛋白質(zhì)相互作用研究。Avi-Tag對(duì)蛋白空間結(jié)構(gòu)的影響非常小，且固定化的Avi-Tag標(biāo)簽融合蛋白應(yīng)用范圍廣。

c-Myc標(biāo)簽：其序列為EQKLISEEDL，可識(shí)別其相應(yīng)的抗體，應(yīng)用于Western-blot雜交技術(shù)、免疫沉淀和細(xì)胞流式術(shù)中，用于檢測(cè)重組蛋白質(zhì)在靶細(xì)胞中的表達(dá)。但需注意，Myc標(biāo)簽蛋白本身即為人的Myc基因的一部分，在應(yīng)用于人的細(xì)胞或組織相關(guān)實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)避免。

標(biāo)簽抗體在研究中的作用

蛋白純化：標(biāo)簽抗體能夠特異性地結(jié)合標(biāo)簽融合蛋白，從而實(shí)現(xiàn)高效的蛋白純化。例如，His標(biāo)簽抗體可用于基于IMAC的蛋白純化，F(xiàn)lag標(biāo)簽抗體則可用于親和層析純化。

蛋白檢測(cè)：標(biāo)簽抗體可用于檢測(cè)融合蛋白的表達(dá)水平、細(xì)胞內(nèi)定位等。通過Western blot、免疫熒光等技術(shù)，研究人員可以直觀地觀察到目標(biāo)蛋白的表達(dá)情況。

蛋白功能研究：標(biāo)簽抗體在蛋白功能研究中發(fā)揮著重要作用。例如，通過免疫沉淀技術(shù)，研究人員可以富集和純化與目標(biāo)蛋白相互作用的蛋白，進(jìn)而揭示其相互作用網(wǎng)絡(luò)和功能機(jī)制。

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究：標(biāo)簽抗體還可用于信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究，通過檢測(cè)標(biāo)簽融合蛋白的表達(dá)和活性變化，揭示信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的調(diào)控機(jī)制。

綜上所述，標(biāo)簽抗體作為基因表達(dá)、蛋白功能及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究中的常用工具，具有效高、特異、簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，越來越多的蛋白標(biāo)簽和抗體被開發(fā)出來，為科學(xué)研究提供了更加豐富的選擇。

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