上期我們了解了什么是CCK8，以及CCK8的優(yōu)點是哪些，這期上海儒安主要給大家科普一下CCK8檢測細(xì)胞增殖/毒性的注意事項。

  1.酚紅和血清對CCK8法的檢測不會造成干擾，可以通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去。

  2.CCK8可以檢測大腸桿菌，但不能檢測酵母細(xì)胞。在細(xì)胞增殖實驗每次測定的過程中需要避免細(xì)菌污染，以免影響結(jié)果。

  3.當(dāng)在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)時，培養(yǎng)板很外一圈的孔很容易干燥揮發(fā)，由于體積不準(zhǔn)確而增加誤差。一般情況下，很外一圈的孔只加培養(yǎng)基，不作為測定孔用。

  4.在培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時間，測定450 nm的吸光度即為空白對照。在做加藥實驗時，還應(yīng)考慮藥物的吸收，可在加入藥物的培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時間，測定450nm的吸光度作為空白對照。

  5.金屬對CCK8顯色有影響：當(dāng)終濃度為1 mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會壓制5%、15%、90%的顯色反應(yīng)，使靈敏度降級。如果終濃度是10 mM的話，將會100%壓制。

  6.懸浮細(xì)胞由于染色比較困難，一般需要增加細(xì)胞數(shù)量和延長培養(yǎng)時間。

  以上這些就是大家在使用CCK8的時候需要注意的一些事項，想要了解更多，歡迎大家關(guān)注上海儒安生物科技有限公司。