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免疫印跡Western-blot技術服務

發(fā)布時間:2020-03-06

瀏覽次數(shù):281

原理: 免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質印跡(Western blotting),是根據(jù)抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術。由于免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術。

免疫印跡常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進行定性和半定量分析。 結合化學發(fā)光檢測,可以同時比較多個樣品同種蛋白的表達量差異。

 2 免疫印跡westernblot服務實驗流程:

 ◎ 細胞及組織蛋白質抽提; ◎ 蛋白質定量; ◎ 變性聚丙烯酰胺不連續(xù)凝膠電泳(SDS-PAGE); ◎ 蛋白質轉膜; ◎ 膜的封閉; ◎ 一抗、二抗孵育; ◎ 結果檢測:化學發(fā)光法檢測,X 膠片曝光顯影; ◎ 數(shù)據(jù)分析;

 2 免疫印跡westernblot技術服務實驗要求:

 1. 客戶需自備一抗,本公司可代為購買一抗。 

 2. 標本盡可能新鮮;標本量:組織塊大于100mg;細胞數(shù)大于6×106。

 3. 技術部將在收到標本后20-30個工作日之內(nèi)提交實驗結果,實驗結果以數(shù)據(jù)和圖片的 形式提交給客戶。

 標本收集及注意事項: 

 對于組織樣品: 采集新鮮組織,離體時間盡量不超過15分鐘,用錫箔紙包埋或者放入凍存管中,先放入液氮中速凍幾個小時或者過夜,再放入-80度冰箱或液氮保存。 

細胞樣品: 

1、貼壁細胞:取大約1*107個貼壁細胞,胰酶消化后加入PBS懸浮細胞,低速離心收集,棄去液體,加入適量的PBS懸浮細胞,轉入離心管中,低速離心沉淀細胞,棄去PBS,放入液氮中速凍,然后轉入-80度冰箱保存。 2、懸浮細胞:離心收集細胞,棄去培養(yǎng)液,加入適量PBS懸浮細胞,轉入小離心管中,低速離心沉淀細胞,棄去PBS,放入液氮中速凍,然后轉入-80度冰箱保存。

 四、聯(lián)系方式:

電話:13818489195(微信) ,021-64157772儒安公眾號.jpg